6
Código ISSN 2588-0551
https://www.inspilip.gob.ec
9
Revista INSPILIP - V 6 - Número 1 - Mayo 2022
6
Ajila A, Oña D, Satán C,
Villavicencio F, Villacís J.
Determinación de la actividad de
ceftolozane/tazobactam en cepas
de Pseudomonas aeruginosa.
Revista cientíca INSPILIP.
2022; 6 (1)
El autor declara estar libre de
cualquier asociación personal o
comercial que pueda suponer un
conicto de intereses en conexión
con el artículo, así como el haber
respetado los principios éticos de
investigación, como por ejemplo
haber solicitado las autorizaciones
de la institución donde se realizó el
estudio, permiso para utilizar los
datos, consentimientos informados
y en caso de tratarse de estudio
observacionales y ensayos clínicos,
autorización de un CEISH, ARCSA,
Medio Ambiente, entre otros, de
acuerdo a la categoría. Además, la
licencia para publicar imágenes de
la o las personas que aparecen en
el manuscrito. Por ello INSPILIP
no se responsabiliza por cualquier
afectación a terceros, tampoco
el INSPI como entidad editora,
ni el Editor, la responsabilidad
de la publicación es de absoluta
responsabilidad de los autores.
Ajila Acuña Andrea
a
, regina0231@hotmail.com
Oña Iza Daniela
a
, dany_b2107@hotmail.com
Satán Salazar Carolina
b
, csatan@inspi.gob.ec
Villavicencio Fernando
b
, fvillavicencio@inspi.gob.ec
Villacís Acuña José
a
, jevillacis@gmail.com
a. Facultad de Medicina, Ponticia Universidad Católica del Ecuador, Quito, Ecuador.
b. Centro de Referencia Nacional de Resistencia a los Antimicrobianos, Instituto Nacional de
Investigación en Salud Pública - Dr. Leopoldo Izquieta Pérez, Quito, Ecuador.
Correspondencia: Fernando Villavicencio Email: fvillavicencio@inspi.gob.ec
Identicación de la responsabilidad y contribución de los autores: Los autores declaran haber
contribuido en idea original (todos los autores), parte metodológica (AA, DO), redacción del
borrador (AA, DO, CS) y redacción del artículo (todos los autores).
Fecha de Ingreso: 21/09/2021. Fecha de Aprobación: 05/01/2022. Fecha de Publicación: 05/01/2022.
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en
cepas de Pseudomonas aeruginosa
Determination of the activity of ceftolozane/tazobactam in strains of Pseudomonas aeruginosa
iD
iD
iD
iD
iD
DOI: https://doi.org/10.31790/inspilip.v6i1.263
Artículo original
Acceso abierto
Resumen
Citación
Introducción: El aumento constante de infecciones producidas por
Pseudomonas aeruginosa se considera una de las principales causas
asociadas a la reducción de alternativas terapéuticas antimicrobianas.
Ceftolozane/tazobactam es un nuevo agente antimicrobiano conformado por
una cefalosporina anti-Pseudomonas y un inhibidor betalactamasa, que posee
una potente actividad frente a P. aeruginosa. El objetivo del presente estudio
fue determinar la actividad de ceftolozane/tazobactam (CEF/TAZ) frente a
cepas de Pseudomonas aeruginosa mediante el método de microdilución en
caldo, a partir de aislados bacterianos conservados en el Instituto Nacional
de Investigación en Salud Pública (INSPI) durante el año 2019. Materiales y
métodos: Estudio de tipo in vitro, observacional, descriptivo y retrospectivo
en el que se analizaron 86 cepas bacterianas de P. aeruginosa procedentes
del Centro de Referencia Nacional de Resistencia a los Antimicrobianos. Se
trabajó con 8 diluciones seriadas (0.25 μg/mL a 32 μg/mL) mediante el método
de microdilución en caldo de CEF/TAZ para determinar la concentración
mínima inhibitoria (CMI). Resultados: Se obtuvo la CMI de CEF/TAZ en las
cepas de P. aeruginosa con un porcentaje de susceptibilidad de 70,93 % y de
resistencia con un porcentaje del 23,26 %. Conclusiones: Al considerarse el
primer estudio realizado en Ecuador, se demostró que ceftolozane/tazobactam
presentó una adecuada actividad in vitro contra aislados de P. aeruginosa.
Palabras clave: Pseudomonas aeruginosa. Antibacterianos.
Farmacorresistencia Bacteriana.
Código ISSN 2588-0551
6
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas aeruginosa
Ajila Acuña A
9
Código ISSN 2588-0551
10
https://www.inspilip.gob.ec
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
6
Abstract
Introduction: The constant increase in infections
caused by Pseudomonas aeruginosa is considered
one of the main causes associated with the
reduction of antimicrobial therapeutic alternatives.
Ceftolozane/tazobactam is a new antimicrobial agent
made up of an anti-Pseudomonas cephalosporin
and a beta-lactamase inhibitor, which has potent
activity against P. aeruginosa. The objective of
the present study was to determine the activity
of ceftolozane/tazobactam (CEF/TAZ) against
Pseudomonas aeruginosa strains by means of the
broth microdilution method, from bacterial isolates
preserved at the National Institute of Public Health
Research (INSPI). during the year 2019. Materials
and methods: In vitro, observational, descriptive and
retrospective study in which 86 bacterial strains of
P. aeruginosa from the National Reference Center
for Antimicrobial Resistance were analyzed. Eight
serial dilutions (0.25 μg/mL to 32 μg/mL) were used
using the CEF/TAZ broth microdilution method to
determine the minimum inhibitory concentration
(MIC). Results: The MIC of CEF/TAZ was obtained
in the P. aeruginosa strains with a percentage of
susceptibility of 70.93% and resistance with a
percentage of 23.26%. Conclusions: Considering the
rst study carried out in Ecuador, it was shown that
ceftolozane/tazobactam presented adequate in vitro
activity against P. aeruginosa isolates.
Keywords: Pseudomonas aeruginosa. Antibacterial.
Bacterial drug resistance.
Introducción
Las bacterias resistentes a múltiples fármacos (MDR,
por sus siglas en inglés multi-drug resistance) no solo
han representado un problema a nivel mundial por el
aumento de morbilidad y mortalidad en los pacientes
infectados, sino que también suponen enormes costos
adicionales para el sistema de salud
1
.
A nes del 2017, la Organización Mundial de la
Salud (OMS) en sus directrices para la prevención
y el control estableció un listado de bacterias
resistentes a los antibióticos, advirtiendo la necesidad
de desarrollar nuevas moléculas contra patógenos de
alta prioridad, asignando dentro de esta categoría a
Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa,
Enterobacterales resistentes a los carbapenémicos
2
.
Pseudomonas aeruginosa es un bacilo gram
negativo distribuido en la naturaleza, suelo y agua;
se caracteriza por ser una bacteria en forma de
bastón con un tamaño aproximadamente de 1.5 a
5 μm de largo y 0.5 a 1 μm de diámetro, posee un
agelo polar que le otorga la motilidad necesaria,
y crece a una temperatura de 37 a 42 ºC. Además,
es considerada una bacteria aerobia facultativa, ya
que en ocasiones puede desarrollarse en condiciones
anaerobias mediante el uso de arginina y nitrógeno
como terminal de aceptación de protones
3
.
Respecto a las infecciones humanas, se lo
clasica como un patógeno oportunista, con bajos
requerimientos nutricionales y puede adaptarse a
condiciones hostiles que otros microorganismos
no son capaces de tolerar. P. aeruginosa posee
varios factores de virulencia que actúan de distintas
maneras en el sistema inmunitario del huésped, entre
los que se encuentran: lipopolisacárido, agelo, pili
tipo IV, sistema de secreción tipo III y VI, exotoxina
A, proteasas, alginato, quorum sensing, formación
de biolm, generación de oxidantes en el espacio
aéreo
4
.
Además, maniesta una notable capacidad para
desarrollar resistencia a los agentes antimicrobianos
mediante numerosos mecanismos en evolución
5
.
P. aeruginosa presenta varios mecanismos de
resistencia como alteraciones o pérdida de porinas,
hiperproducción de la betalactamasa cromosómica
AmpC, sobreexpresión de bombas de expulsión
activa, β-lactamasas plasmídicas, y una limitada
permeabilidad para agentes antimicrobianos, los
que se han expresado en distintas familias de
antimicrobianos como son los betalactámicos,
sulfonamidas, quinolonas y aminoglucósidos
(Tabla 1)
6, 7
.
Código ISSN 2588-0551
https://www.inspilip.gob.ec
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas
Ajila Acuña A
11
6
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
Código ISSN 2588-0551
en los pulmones de pacientes infectados, esto se
debe a la alta capacidad de la bacteria por sobrevivir
al ataque del antibiótico ante alteraciones transitorias
en la expresión de genes o en las proteínas que dan
respuesta a un estímulo, puede ser reversible
8
.
A nivel mundial, Pseudomonas aeruginosa se
considera la quinta causa de infecciones asociadas
a la atención de la salud (IAAS), provocando
un aumento constante de la resistencia a los
antimicrobianos
10
.
En los últimos años, la prevalencia de cepas de
P. aeruginosa MDR se ha elevado, con tasas de entre
el 15 % y el 30 % en países desarrollados como
Estados Unidos y España, respectivamente
11
; en
países de América Latina, México reportó 11,60 %
y Venezuela un 10,30 %, mostrando así las tasas más
altas a nivel de la región
12
.
En el estudio de Auta et al.
13
, compararon distintos
artículos a nivel mundial acerca de la frecuencia
de venta y suministro de antibióticos sin receta
en farmacias comunitarias de todo el mundo y
presentaron resultados de que el suministro de
antibióticos sin receta tuvo un mayor porcentaje en
países en vías de desarrollo de América
Los mecanismos de resistencia más representativos
que ha presentado P. aeruginosa se clasican
en resistencia intrínseca, adquirida y resistencia
adaptativa
8
.
La resistencia intrínseca se basa en la capacidad
innata de disminuir la ecacia de un antibiótico
especíco mediante características estructurales o
funcionales inherentes, principalmente por la escasa
permeabilidad de la membrana externa, expresión
de bombas de expulsión, mutaciones que alteran el
sitio de acción de algunos agentes antimicrobianos
y la inactivación de enzimas por cefalosporinasa
cromosómica de tipo AmpC inducible
9
.
Mientras que la resistencia adquirida contribuye
en gran medida al desarrollo de cepas resistentes
a múltiples fármacos, y esto sucede por cambios,
mutaciones o mediante la transferencia horizontal
de elementos genéticos móviles que se encargan de
transportar enzimas como β-lactamasas de espectro
extendido (BLEE), carbapenemasas de clase A y D
de Ambler, y metalo-β-lactamasas (MBL) de clase B
de Ambler para obtener genes de resistencia
9
.
Y, por último, se encuentra la resistencia adaptativa,
en la que los antimicrobianos son menos efectivos
en cepas inicialmente susceptibles a un antibiótico
especíco, provocando la formación de biopelículas
Mecanismo
Impermeabilidad
Bombas de eflujo
β-lactamasas
Modificación del blanco
del an�microbiano
Transferencia horizontal
OprD, OprD, OprB
MexAB-OprM,
MexXY-OprM,
MexCD -OprJ,
MexEF- OprN
AmpD, DacB, AmpR, AmpC
GyrA7, GyrB, topoisomerasa
�po Iv (ParC/ParE) rmtA
Metalo-β-lactamasas-clase B
Imipenem, meropenem,
quinolonas, aminoglucósidos
β-lactámicos, fluoroquinolonas,
aminoglucósidos
β-lactámicos,
penicilinas an�pseudomonas
Fluoroquinolonas,
aminoglucósidos
Penicilinas,
cefalosporinas, imipenem
Resistencia al an�microbianoGen/Proteína
Tabla 1. Mecanismo de resistencia por Pseudomonas aeruginosa
Fuente: Paz-Zarza et al. Pseudomonas aeruginosa: patogenicidad y resistencia
anmicrobiana en la infección urinaria. Revista Chilena de Infectología; 2019.
Código ISSN 2588-0551
6
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas aeruginosa
Ajila Acuña A
9
Código ISSN 2588-0551
12
https://www.inspilip.gob.ec
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
6
Latina con un 78 %, ocasionando que la gama
de agentes terapéuticos activos sea cada vez más
limitada por la aparición y propagación de resistencia
a los antibióticos.
Por el incremento de resistencias, se han desarrollado
nuevos antimicrobianos que poseen una mayor
actividad contra patógenos gram negativos MDR
y que actúan como sustitutos prometedores en la
terapia antimicrobiana, como los agentes ceftazidime/
avibactam, ceftolozane/tazobactam, imipenem/
relebactam y cederocol, los que han demostrado
en varios estudios in vitro espectros de actividad
antimicrobiana más amplios contra infecciones
causadas por P. aeruginosa
14
.
De igual manera, en los últimos años han existido
nuevas investigaciones en torno a próximos
antimicrobianos activos para futuras estrategias
terapéuticas como meropenem/vaborbactam,
cefepime/zidebactam, plazomicina, eravaciclina,
murepavadi, aunque por el momento no cuentan con
puntos de corte en CLSI
11
.
CEF/TAZ es una combinación antimicrobiana
de amplio espectro, activa frente a bacterias
gram negativas incluyendo cepas MDR/XDR
P. aeruginosa. Ceftolozane, es una cefalosporina de
generación avanzada que inhibe las PBP, las variantes
TEM y SHV, no ESBL y las enzimas AmpC; mientras
que tazobactam es un inhibidor de betalactamasas
irreversible que se dirige a lasserina β-lactamasas de
clase A y las ESBL
15
.
CEF/TAZ, también conocido por su nombre
comercial como zerbaxa, cuenta con la aprobación
de la Administración de Drogas y Alimentos de los
Estados Unidos (FDA, por sus siglas en inglés Food
and Drug Administration) y de la Agencia Europea
de Medicamentos (EMA, por sus siglas en inglés
European Medicines Agency)
16
.
Ceftolozane/tazobactam es una de las opciones
aprobada por la FDA para infecciones urinarias
complicadas, incluyendo pielonefritis, infecciones
intraabdominales complicadas, neumonía adquirida
en el hospital (HABP) y neumonía asociada al
ventilador (VABP) (17), siendo una buena opción para
cepas MDR y XDR. CEFT/TAZ permanece activo
en la sobreproducción de AmpC, la sobreexpresión
de ujo de salida de las bombas, y la pérdida de la
porina de membrana externa OprD, que son comunes
en P. aeruginosa
18
.
La actividad antimicrobiana de CEF/TAZ se ha
evaluado en varios países de América Latina como
Argentina, Brasil, Chile, Costa Rica, México y
Panamá
19
.
Sin embargo, hasta la fecha no se han realizado
investigaciones con aislamientos procedentes de
Ecuador. Debido a la importancia clínica de este
antimicrobiano se propone la presente investigación
en la que se usaron cepas aisladas de P. aeruginosa
del año 2019, procedentes del Centro de Referencia
Nacional de Resistencia a los Antimicrobianos
(CRN-RAM) del INSPI-Quito para determinar
la concentración mínima inhibitoria (CMI) de
CEF/TAZ con la nalidad de determinar su perl
de susceptibilidad, siendo este el primer estudio
realizado en el Ecuador.
Materiales y métodos
Aislados bacterianos
En el estudio se utilizaron 86 microorganismos
identicados fenotípicamente como Pseudomonas
aeruginosa recolectados del cepario del CRN-RAM
del INSPI-Quito del año 2019. Todas las cepas
incluidas en esta investigación fueron caracterizadas
mediante pruebas macroscópicas (agar Mac Conkey),
microscópicas (tinción Gram) y microbiológicas
(oxidasa y catalasa positiva, y prueba de motilidad en
agar SIM con resultado positivo). Uno de los criterios
de inclusión fue que las cepas presenten resultados
de resistencia a carbapenémicos sin la presencia
de carbapenemasa. Los aislados bacterianos de
P. aeruginosa fueron conservados a una temperatura
de -80 ºC.
Cabe mencionar, que la investigación se centró en
determinar la actividad de Pseudomonas aeruginosa
frente a la combinación de antibióticos ceftolozane/
tazobactam, mediante el método de microdilución en
caldo para determinar la resistencia o sensibilidad a
los mismos, sin llegar a la caracterización molecular
de estas.
Método de microdilución en caldo
Para establecer el valor de la CMI de ceftolozane/
tazobactam en las cepas aisladas de Pseudomonas
aeruginosa, se aplicó el método de microdilución
en caldo basándose en la Guía MO7-11ED del CLSI
2018.
Código ISSN 2588-0551
https://www.inspilip.gob.ec
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas
Ajila Acuña A
13
6
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
Código ISSN 2588-0551
También se empleó la guía M100 del CLSI vigente
para la interpretación de los puntos de corte
correspondientes al antibiótico en cada cepa aislada
de P. aeruginosa. Se preparó la solución madre a
partir de los siguientes parámetros: pureza y fracción
activa para el antibiótico liolizado ceftolozane a
una concentración de 1962.5 μg/mL y la solución
madre del antibiótico liolizado tazobactam a una
concentración de 318.64 μg/mL; para reconstituir
ambos antibióticos se utilizó como solvente y
diluyente agua molecular.
A partir de la solución madre del antibiótico liolizado
ceftolozane se realizó la solución de trabajo con
una concentración de dilución de 256 μg/mL. En
la preparación de las diluciones de ceftolozane/
tazobactam se trabajó en ocho tubos que contaron
con las siguientes concentraciones: de 32/4 μg/mL,
16/4 μg/mL, 8/4 μg/mL, 4/4 μg/mL, 2/4 μg/mL, 1/4
μg/mL, 0.5/4 μg/mL y 0.25/4 μg/mL.
Se utilizaron Klebsiella pneumoniae ATCC 2146
y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 como
controles positivo y negativo, respectivamente.
Resultados
Descripción general de la población en el estudio
En el presente estudio se utilizaron 86
microorganismos de Pseudomonas aeruginosa
procedentes del cepario de CRN-RAM del
INSPI-Quito del año 2019. Todas las cepas
incluidas en esta investigación fueron aisladas en
distintas instituciones de salud para su respectiva
caracterización mediante pruebas macroscópicas,
microscópicas y microbiológicas. Los aislados
bacterianos de P. aeruginosa fueron conservados a
una temperatura de -80ºC.
De acuerdo con las variables clínico -
epidemiológicas obtenidas de la base de datos
WHONET, se observó que la procedencia de los
aislados correspondía en 61,63 % (n=53/86) al género
masculino y 38,37 % (n=33/86) al género femenino
con un rango de edad de 0 a 83 años, siendo el grupo
de 51-75 años el más predominante (Tabla 2). A
pesar de los datos obtenidos, se puede mencionar
que P. aeruginosa es un patógeno oportunista que
puede afectar a cualquier individuo, todo depende
del estado de salud de este.
Respecto al servicio hospitalario, la mayoría de
aislados procedía de consulta externa con un 50 %
(n=43/86), seguido de los servicios hospitalarios
de UCI, cirugía y hospitalización con un 16,28 %
(n=14/86), 13,95 % (n=12/86) y 12,79 % (n=11/86),
respectivamente (Tabla 2). Estos datos fueron
relevantes, debido a que el porcentaje de UCI fue
menor, pese a que este servicio hospitalario es el
más vulnerable por las altas tasas de colonización
de P. aeruginosa en individuos inmunodeprimidos,
especialmente en aquellos pacientes que atraviesan
largos períodos de hospitalización.
Los tipos de muestras clínicas de las que provienen
las cepas de P. aeruginosa utilizadas en el estudio,
fueron en su mayoría secreciones, abscesos y
heridas, representadas por el 38,37 % (n=33/86),
seguido de muestras respiratorias con un 25,58 %
(n=22/86), y hemocultivos con un 11,63 % (n=10/86)
(Tabla 2). Adicionalmente, se obtuvieron aislados de
P. aeruginosa en menor frecuencia a partir de catéter,
orina y líquidos, dato que genera interés sobre este
patógeno debido a su excepcional capacidad de
adaptación.
Código ISSN 2588-0551
6
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas aeruginosa
Ajila Acuña A
9
Código ISSN 2588-0551
14
https://www.inspilip.gob.ec
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
6
Los resultados obtenidos de la CIM se interpretaron
según los puntos de corte de ceftolozane/tazobactam
establecidos en la guía M100 del CLSI 2020 como
sensible ≤4/4 µg/mL, intermedio 8/4 µg/mL y
resistente ≥16/4 µg/mL.
Se determinó un porcentaje de susceptibilidad
del 70,93 % para ceftolozane/tazobactam que
corresponde a 61 aislados de P. aeruginosa de 86
cepas, los mismos que presentaron valores de CMI
con patrón sensible entre <0.25 µg/mL a 4 µg/mL.
Mientras que 5 aislados mostraron un patrón de
sensibilidad intermedia con un valor de 8 µg/mL y
20 aislados se determinaron como resistentes con
valores de MIC >16 µg/mL (Tabla 3).
En relación con las 20 cepas que presentaron
resistencia a ceftolozane/tazobactam, 8 de estos
aislados fueron positivos para el gen tipo GES (9,30
%) a través de amplicación del gen blaGES por
PCR de punto nal, dato que fue proporcionado
por CRN-RAM del INSPI-Quito. Se atribuye que
la resistencia a ceftolozane/tazobactam pudo ocurrir
a través de la adquisición de una BLEE especíca,
en este caso por la presencia del gen GES en
P. aeruginosa.
Variable
n
Género
Femenino
33
Masculino
53
Total
86
Rangos de edad
0-25 años
14
26 -50 años
26
51 -75 años
40
> 76 años
6
Total
86
Servicio
hospitalario
Consulta Externa
43
Unidad de Cuidados
Intensivos (UCI)
14 16,28 %
Cirugía
12
Hospitalización
11
Emergencia
3
Pediatría
2
Geriatría
1
Total
86
Tipo de
muestra
Secreciones, abscesos y
heridas
33 38,37 %
Respiratorio
22
Sangre
10
Orina
6
Gastrointes�nal
5
Otros (pie diabé�co y
prótesis)
5 5,81 %
Catéter
4
Líquidos
1
Total
86
Tabla 2. Variables clínico-epidemiológicas
Código ISSN 2588-0551
https://www.inspilip.gob.ec
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas
Ajila Acuña A
15
6
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
Código ISSN 2588-0551
Discusión
La resistencia bacteriana principalmente en patógenos
gram negativos continúa en aumento, limitando
en gran medida las opciones de tratamiento para
infecciones causadas por ciertos patógenos MDR
20
.
Durante la última década, Pseudomonas aeruginosa
ha sido un problema cada vez mayor en el sistema
de salud debido a la proliferación de resistencias
a múltiples fármacos acompañado de la creciente
prevalencia de IAAS, lo que compromete gravemente
la selección de antimicrobianos adecuados
21
.
Ceftolozane/tazobactam ha demostrado una buena
actividad contra estos microorganismos, incluidos
Enterobacterales y Pseudomonas aeruginosa
MDR
20
.
En este contexto, los resultados que se obtuvieron en
este estudio permiten comprender el comportamiento
del antibiótico ceftolozane/tazobactam usando la
metodología de microdilución en caldo, considerada
como “gold standard” en 86 cepas de P. aeruginosa
aisladas en el período 2019.
Respecto al análisis de las variables epidemiológicas
que fueron obtenidas de la base de datos WHONET
del período 2019 se identicó que el género
predominante de las cepas aisladas de P. aeruginosa
fue el masculino con una frecuencia de 61,63 % y en
el rango de edad se evidenció un mayor porcentaje en
la categoría de 51-75 años con un 46,51 %.
En el estudio de Calderón y Fontalvo
22
se reportó
que los aislamientos de P. aeruginosa se presentaron
con mayor frecuencia en el género masculino
(61,90 %), y que la media de edad de los pacientes fue
de 58 años en un rango de edad mínimo de 4 meses
y edad máximo de 90 años, datos que se asemejan
a lo obtenido en el presente estudio. Frente a estos
resultados se puede mencionar que la edad y el
género no son determinantes a la hora de padecer una
infección por P. aeruginosa, sin embargo, el estado
inmunológico y otros factores de riesgo que puede
presentar el paciente, representan una amenaza
23
.
En cuanto al servicio hospitalario, los aislamientos
de P. aeruginosa analizados, en su mayor parte
fueron del área de Consulta Externa con un 50 %, a
diferencia de lo publicado en otros estudios, donde
obtuvieron un 33,33 % de aislados procedentes del
servicio de hospitalización general y 34,21 % de UCI
24-22
.
Con relación al tipo de muestra de los aislados
bacterianos, gran parte procedió de secreciones,
abscesos y heridas (38,37 %), seguido con un 25,58 %
de muestras respiratorias y 11,63 % de hemocultivos.
Sin embargo, en el estudio de Muñoz et al.
24
.
obtuvieron un 50 % de muestras del tracto respiratorio
y un 19,23 % de secreciones de heridas; asimismo,
otros autores reeren el 27,63 % a muestras de orina
y de secreciones con un 23,68 %
22
.
Esta discrepancia del servicio hospitalario y del tipo
de muestra da a conocer que el comportamiento de
este patógeno oportunista es versátil por su capacidad
de adaptación, patogenicidad, transmisibilidad y
resistencia a los antimicrobianos, le brinda una
ventaja competitiva para lograr colonizar diferentes
sitios anatómicos, por lo que ocasiona un amplio
rango de infecciones
25
.
En la determinación de la CMI de ceftolozane/
tazobactam, el porcentaje de susceptibilidad que se
An�bió�co
Número de aislamientos con relación a la CMI (µg/mL)
CEF/TAZ
Sensible
Intermedio
Resistente
Total
<0.25/4
0.25/4
0.5/4
1/4
2/4
4/4
8/4
16/4
32/4
>32/4
nº
3
0
19
6
22
11
5
1
4
15
86
% 70,93 % 5,81 % 23,26 %
100
%
Pseudomonas aeruginosa
Tabla 3. Resultados de la CMI de ceftolozane/tazobactam de las cepas de P. aeruginosa
Código ISSN 2588-0551
6
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas aeruginosa
Ajila Acuña A
9
Código ISSN 2588-0551
16
https://www.inspilip.gob.ec
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
6
obtuvo fue de 70,93 % con una mayor concentración
de CMI en 0.5 µg/mL, 2 µg/mL y 4 µg/mL. Estos datos
de sensibilidad demostraron una buena actividad
antimicrobiana in vitro contra P. aeruginosa, los
cuales se correlacionan con el estudio de Mojica et
al.
26
.
que determinó en países de América Latina una
susceptibilidad del 80,55 %, 70 %, 68,30 %, 66,10 % y
64,40 % correspondientes a Chile, Argentina, Brasil,
Colombia y México. Asimismo, el estudio Tuon et
al.
27
, que fue realizado en múltiples centros médicos
de Brasil, demostró que esta nueva combinación
antimicrobiana contra aislados de P. aeruginosa
proporcionó una cobertura del 84,90 %.
Los datos de estos estudios, en conjunto con
los obtenidos en esta investigación, indican que
ceftolozane/tazobactam presenta una buena actividad
frente a P. aeruginosa, en comparación a los demás
antibióticos anti-Pseudomonas, siendo así una opción
aprobada por la FDA desde 2014 para infecciones
urinarias complicadas, incluyendo pielonefritis,
infecciones intraabdominales complicadas, y desde
el 2019 ampliaron la aprobación para neumonía
adquirida en el hospital (HABP) y neumonía asociada
al ventilador (VABP)
17
.
Se evidencia un 23,26 % de resistencia a ceftolozane/
tazobactam. En el estudio de Mojica et al.
26
, las
cepas de P. aeruginosa de países como Chile, Brasil
y México presentaron altas tasas de resistencia a
ceftolozane/tazobactam de 19,45 %, 31,70 % y
35,60 %, respectivamente, semejante situación en
Argentina y Colombia con un 30 % y 33,90 %.
De igual manera, en el estudio de Calderón y
Fontalvo
22
, realizado en Colombia, obtuvieron un
porcentaje de resistencia del 25 % en aislamientos de
P. aeruginosa, donde existió una mayor frecuencia
de CMI ≥256 μg/mL.
Acerca de las cepas que presentaron resistencia a
ceftolozane/tazobactam en este estudio (23,26 %),
8 aislados fueron positivos para el gen tipo GES,
debido a que pertenecen a las carbapenemasas tipo
A
28
.
Entre las variantes GES descritas en el estudio
de Poirel et al.
29
identicaron a GES-1 como un
carbapenémico ahorrador de betalactamasa de
espectro extendido, y a las variantes GES-2 y GES-5
con una esencial actividad carbapenemasa.
Sin embargo, la resistencia a ceftolozane/tazobactam
pudo deberse sobre todo a la adquisición de una BLEE
especíca en P. aeruginosa como la variante GES-6,
la que fue responsable del incremento de la actividad
hidrolítica hacia carbapenémicos y ceftolozane, con
resistencia a ciertos inhibidores de betalactamasas
como tazobactam
29
.
Según el estudio de Tuon et al.
27
, mediante ensayos
de secuenciación de genoma completo identicaron
que las cepas resistentes a CEF/TAZ pueden presentar
una sobreexpresión de la cefalosporinasa AmpC, lo
que podría ocasionar mutaciones puntuales en el gen
blaPDC.
De igual manera, dicha sobreexpresión de AmpC se
asocia con las sustituciones G27D, V205L, G391A,
T105A, E114A, G283E y M288R
27, 28
. Otro posible
factor relacionado con la resistencia a ceftolozane/
tazobactam es la modicación de la diana PBP
(proteínas de unión a la penicilina).
Conclusión
Ceftolozane/tazobactam representan buenas
alternativas terapéuticas para tratar infecciones
ocasionados por P. aeruginosa y Enterobacterales.
Asimismo, al considerarse el primer estudio realizado
en Ecuador de ceftolozane/tazobactam se demostró
una adecuada actividad in vitro contra aislados de
P. aeruginosa procedentes del cepario de CRN-RAM
del INSPI-Quito.
A pesar de que CEF/TAZ no se encuentra disponible
en Ecuador, los resultados de este trabajo construyen
una base de evidencia cientíca para la posible
consideración de esta combinación de antibióticos
como opción terapéutica en casos de infecciones
urinarias complicadas, incluyendo pielonefritis,
infecciones intraabdominales complicadas, neumonía
adquirida en el hospital y neumonía asociada a
ventilación mecánica por P. aeruginosa resistente a
carbapenémicos, sin producción de carbapenemasa.
Por lo que se consideraría ideal que esta combinación
antimicrobiana se agregue al cuadro nacional de
medicamentos una vez que llegue al país, junto con la
investigación de métodos de laboratorio ya existentes
en el mercado epsilon test, métodos automatizados y
el método de microdilución en caldo para contribuir
al sistema de salud pública, con el objetivo de
impulsar nuevas investigaciones que aporten con
datos cientícos al país.
Código ISSN 2588-0551
https://www.inspilip.gob.ec
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas
Ajila Acuña A
17
6
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
Código ISSN 2588-0551
Agradecimientos
El antibiótico ceftolozane fue donado por Merck.
Conicto de intereses: Los autores declaran no tener
conictos en la publicación del presente manuscrito.
Fuente de nanciamiento: Propio de los autores.
Referencias bibliográcas
1. García Fernández S, García Castillo M, Bou G,
Calvo J, Cercenado E, Delgado M, et al. Activity
of ceftolozane/tazobactam against
Pseudomonas
aeruginosa and Enterobacterales isolates recovered
from intensive care unit patients in Spain: The
SUPERIOR multicentre study. International journal
of antimicrobial agents. 2019; 53(5): p. 682-688.
Disponible en: https://www.sciencedirect.com/
science/article/abs/pii/S0924857919300275. https://
doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2019.02.004.
2. Organización Mundial de la Salud. Organización
Mundial de la Salud (OMS). [Online].; 2017. Acceso
01 de 03 de 2021. Disponible en: https://www.who.
int/es/news/item/27-02-2017-who-publishes-list-of-
bacteria-for-which-new-antibiotics-are-urgently-nee-
ded.
3. Instit uto Nacional de Segu ridad de Higiene en el Tr abajo.
Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo.
[Online]; 2016. Acceso 20 de abril de 2019. Disponible
en: https://www.insst.es/documents/94886/353495/
Pseudomonas+aeruginosa+2017.pdf/7e1ed73b-
eca5-4578-a4f7-1c8847e6a799.
4. Rocha et al.
Pseudomonas Aeruginosa: Virulence
factors and antibiotic resistance genes. Brazilian
Archives of Biology and Technology. 2019; 62.
doi:10.1590/1678-4324-2019180503
5. Yi-Wei T, Sussman M, Dongyou L, Schwartzman J.
Molecular Medical Microbiology: Elsevier Ltd. All
rights reserved.; 2015.
6. Luján Roca DA.
Pseudomonas aeruginosa: un
adversario peligroso. Acta Bioquímica Clínica
Latinoamericana. 2014; 48(4): p. 465-474. Disponible
en: http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_ar-
ttext&pid=S0325-29572014000400009&lng=es
7. Paz-Zarza et al.
Pseudomonas aeruginosa:
patogenicidad y resistencia antimicrobiana en la
infección urinaria. Revista Chilena de Infectología.
2019; 36(2): p. 180-189. Disponible en: http://
www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pi-
d=S0716-10182019000200180&lng=es. http://dx.doi.
org/10.4067/S0716-10182019000200180.
8. Pang Z, Raudonis R, Glick B, Lin T, Cheng Z.
Antibiotic resistance in
Pseudomonas aeruginosa:
mechanisms and alternative therapeutic strategies.
Biotechnology Advances. 2019; 37(1): p. 177-192.
Disponible en: https://www.sciencedirect.com/
science/article/pii/S0734975018301976. https://doi.
org/10.1016/j.biotechadv.2018.11.013
9. Espinoza Pesántez Diana Isabel, Esparza Sánchez
Germán Francisco. Resistencia enzimática en
Pseudomonas aeruginosa, aspectos clínicos y
de laboratorio. Revista Chilena de Infectología.
2021; 38(1): p. 69-80. Disponible en: http://
www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pi-
d=S0716-10182021000100069&lng=es. http://dx.doi.
org/10.4067/S0716-10182021000100069
10. Goodlet K, Nicolau D. In vitro comparison of
ceftolozane-tazobactam to traditional beta-lactams
and ceftolozane-tazobactam as an alternative to
combination antimicrobial therapy for
Pseudomonas
aeruginosa. Antimicrob Agents Chemother. 2017;
61(12), e01350-17. doi: 10.1128/AAC.01350-17
11. Horcajada et al. Epidemiology and treatment of
multidrug-resistant and extensively drug-resistant
Pseudomonas aeruginosa infections. Clinical
Microbiology Reviews. 2019; 32(4): p. e00031-19.
doi: 10.1128/CMR.00031-19
12. Huerta-Gutiérrez R, Braga L, Camacho-Ortiz A,
Díaz-Ponce H, García-Mollinedo L, Guzmán-Blanco
M VBSLNEMESMORRZ, et al. One-day point
prevalence of healthcare-associated infections and
antimicrobial use in four countries in Latin America.
Int J Infect Dis. 2019; 86: p. 157-166. doi: 10.1016/j.
ijid.2019.06.016
13. Auta et al. Global access to antibiotics without
prescription in community pharmacies: A systematic
review and meta-analysis. Journal of Infection. 2019;
78(1): p. 8-18. doi: 10.1016/j.jinf.2018.07.001
14. Bassetti M, Peghin M, Vena A, Giacobbe DR.
Treatment of infections due to MDR gram-negative
bacteria. Frontiers in Medicine. 2019; 6. doi: 10.3389/
fmed.2019.00074
15. Barnes MD, Taracila MA, Rutter JD, Bethel CR,
Galdadas I, Hujer AM, et al. Deciphering the evolution
of cephalosporin resistance to ceftolozane-tazobactam
in
Pseudomonas aeruginosa. mBio. 2018; 9(6): p.
e02085-18. doi: 10.1093/jac/dkaa291
6
Determinación de la actividad de ceftolozane/tazobactam en cepas de Pseudomonas aeruginosa
Ajila Acuña A
9
Código ISSN 2588-0551
18
https://www.inspilip.gob.ec
6
Revista INSPILIP - V. 6 - Número 1 - Mayo 2022
6
16. Helio S, Jones D, Castanheira M. Antimicrobial
activity of ceftolozane/tazobactam tested against
Pseudomonas aeruginosa and Enterobacteriaceae
with various resistance patterns isolated in European
hospitals (2011–2012). Journal of Antimicrobial
Chemotherapy. 2014;: 9 (10): 2713-22. doi: 10.1093/
jac/dku184.
17. WHONET. RED WHONET - Argentina. [Online].;
2020. Acceso 08 de marzo de 2021. Disponible en:
http://antimicrobianos.com.ar/ATB/wp-content/
uploads/2020/07/Protocolo-WHONET-aproba-
do-2020-nal-2.pdf.
18. Poulakou G, Lagou S, Karageorgopoulos DE,
Dimopoulos G. New treatments of multidrug-resistant
gram-negative ventilator-associated pneumonia.
Annals of Translational Medicine. 2018; 6(21): 423:
p. 421-423. doi: 10.21037/atm.2018.10.29.
19. Ponce de Leon A, Merchant S, Raman G, Avendano E,
Chan J, Hernandez G, et al.
Pseudomonas infections
among hospitalized adults in Latin America: a
systematic review and meta-analysis. BMC Infect
Dis. 2020; 20 (1): 250: p. 20-21. doi: 10.1186/
s12879-020-04973-0
20. Hirsch E, Brigman H, Zucchi P, Chen A, Anderson
J, Eliopoulos G, et al. Actividad de ceftolozano/
tazobactam y ceftazidima/avibactam contra
Pseudomonas aeruginosa resistente a β-lactámicos
y enterobacterales productores de β-lactamasa de
espectro extendido de centros médicos de EE. UU. J
Glob Antimicrob Resist. 2020; 156: p. 689-694. doi:
10.24875/GMM.19005335
21. Schmidt-Malan SM, Mishra AJ, Mushtaq A, Brinkman
CL, Patel R. In vitro activity of imipenem-relebactam
and ceftolozane-tazobactam against resistant
gram-negative bacilli. Antimicrobial agents and
chemotherapy. 2018; 62(8): p. e00533-18. doi:
10.1128/AAC.00533-18
22. Calderón Majé LA, Fontalvo Torres LC. Perl de
susceptibilidad in vitro de
Pseudomonas aeruginosa
frente a ceftolozane/tazobactam. Ponticia
Universidad Javeriana Colombia. 2019.
23. Bravo-Burguillos Ros L. Universidad Complutense
Madrid. [Online].; 2018. Acceso 08 de marzo de 2021.
Disponible en: https://eprints.ucm.es/id/eprint/62479/.
24. Muñoz L, Grosolli V, Mella S, Riedel G, Opazo M,
Vega-Yánez F. Perl de susceptibilidad y detección
de carbapenemasas en
Pseudomonas aeruginosa
resistentes a carbapenémicos del Hospital Regional
Dr. Guillermo Grant Benavente de Concepción,
durante 2017-2019. Revista Chilena de Infectología.
2020; 87((Supl 1)): p. 89-93.
25. Cabot G, López-Causapé C, Ocampo-Sosa A, Sommer
L, Domínguez M, Zamorano L, et al. Deciphering
the resistome of the widespread
Pseudomonas
aeruginosa sequence type 175 international
high-risk clone through whole-genome sequencing.
Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 2016;
60(12): p. 7415-7423. doi: 10.1128/AAC.01720-16
26. Mojica M, Rios R, De La Cadena E, Correa A, Diaz L,
Millan L, et al. Molecular mechanisms leading to cef-
tolozane-tazobactam resistance in clinical isolates of
Pseudomonas aeruginosa from ve Latin American
countries. In Open Forum Infectious Diseases. 2019;
6(Supplement 2): p. S285-S286. doi: 10.1093/od/
ofz360.681
27. Tuon F, Cieslinski J, Rodrigues S, Serra F, Negra de
Paula M. Evaluation of in vitro activity of ceftoloza-
ne-tazobactam against recent clinical bacterial isolates
from Brazil - the EM200 study. Braz J Infect Dis. 2020;
24(2): p. 96-103. doi: 10.1016/j.bjid.2020.04.004.
28. Prado-Montoro CD, Ruiz-Aragón J, Martínez
Rubio C, García-Martín S, Freyre-Carrillo C,
& Rodríguez-Iglesias MA. Evaluación de la
sensibilidad de cepas de
Pseudomonas aeruginosa
multirresistentes frente a ceftolozano/tazobactam.
Revista Chilena de Infectología. 2019; 36(5): p.
551-555. doi: 10.4067/S0716-10182019000500551.
29. Poirel L, Ortiz de la Rosa JM, Nordmann P. ESBLs and
resistance to ceftazidime/avibactam and ceftolozane/
tazobactam combinations in Escherichia coli and
Pseudomonas aeruginosa. Antimicrob Chemother.
2019; 74 (7): 1934-193. doi: 10.1093/jac/dkz149.
30. Arca-Suárez J, Vázquez-Ucha JC, Fraile-Ribot
PA, Lence E, Cabot G, Martínez-Guitián M, et
al. Molecular and biochemical insights into the
in vivo evolution of AmpC-mediated resistance
to ceftolozane/tazobactam during treatment of an
MDR
Pseudomonas aeruginosa infection. Journal
of Antimicrobial Chemotherapy. 2020; 75(11): p.
3209-3217. doi: 10.1093/jac/dkaa291.